透析原理
利用溶液中不同分子穿透半透膜時擴散速度不同,以及半透膜孔徑對於較孔徑大之分子的限制來進行特定分子的純化分離。這裡所提的半透膜就是 透析膜。
最常應用於蛋白質、DNA與多醣等大分子樣品去鹽或去除其中染劑等小分子物質,也常應用在緩衝液交換與藥物結合研究
關於 MFPI 透析膜
材質 再生纖維 (regenerated cellulose)
特性 :
化學兼容性佳 ( DMSO, 氯仿, 醋酸 (96%), 乙?, 酒精 (98%) 等都 OK
超低蛋白吸附 以 Cytochrome C 測試 Cellu-Sep 與他牌兩種常見的透析膜材質 ﹝纖維素酯 (cellulose ester)•醋酸纖維 (cellulose acetate)﹞
其吸附率比較如下 :
- Cellu-Sep 0.002%
- Cellulose Ester 0.800%
- Cellulose Acetate 2.300%
關於 MWCO ( 截留分子量 )
- 透析膜是以 MWCO 表示其孔徑,所標示的分子量不是絕對值,而是平均值。所以想以透析方式分離兩大小很接近的分子是行不通的 !
- 建議以欲分離的大分子分子量除以2後的值決定
基本使用方式 (建議戴上手套後進行)
1. 將透析膜裁剪至適當長度 (可參考規格表中『每公分容量』欄估算)
2. 以蒸餾水浸泡裁好的透析膜,直到膜軟化 (至少需15分鐘)
3. 回折透析膜一端開口後,用透析膜夾封住,使其成為袋狀
4. 自另一開口注入欲透析的溶液後,同樣地,回折開口再用透析膜夾封住
5. 將透析袋放入盛有緩衝液或水的燒杯中,置入攪拌子
6. 把燒杯放在攪拌器上,使其中溶液一邊混合一邊進行透析
7. 視需要,不時更換燒杯中的緩衝液或水使透析效果更佳
(若使用 D-Clear 系列溼式透析膜,可省略步驟1 & 2,但建議以蒸餾水或buffer略為沖洗以去除含有防腐劑的保存液成份)
凡購買一組加贈夾具 ( Locking Dialysis Membrane Clamps ) 二支 ( 夾具型號 : DC65-50 46mm, 10/pk , DC90-70 70mm,10/pk
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產品網頁 : http://www.scibio.com.tw/pdf%202/CelluSep%20DM%201070119.pdf